行业新闻
纳德始终坚持“以人为本、质量为先”的企业宗旨，秉承“严谨、文明、热情、高效”的企业作风
优化实验室仪器PCR仪温度退火
发布时间：2020-09-25
实验室仪器当中PCR仪试验是比较简单的分子生物学实验了，但是通常会受到下列各种因素的影响……
提到 PCR仪试验优化，大家的第一反应就是优化退火温度，但你知道变性温度也需要优化吗？
小编告诉你，实在太有必要了！来看看下面的实验：一个证明变性温度也很重要的实验
实验样品：20ng 人基因组 DNA (Roche)
目标基因：β-actin 基因，扩增产物长度 484bp，主要的非特异扩增产物长度 350bp
扩增参数：
在扩增后的样品加入 GelRed (Biotium) 染料，琼脂糖电泳后用凝胶成像系统采集凝胶图像。我们得到的结果是这样的：
上方的红框：
当我们把变性温度提高到 98.5 度，退火温度在 58 度时，已经开始出现单一的扩增带，白色模模糊糊的非特异性扩增带就已经消失了。而如果把变性温度设置在 95 度，退火温度需要提升至 70 度，非特异性扩增带才会消失。
下方的红框：
在退火温度相同的情况下（从 60.8-68.5 度），如果使用更低的变性温度（93.4度），可以看到主条亮度要明显高于 95 度变性时的亮度，也就是产量更高。
实验表明，同时优化退火温度和变性温度，才能准确找到最符合我们需求的反应温度。看到优化变性温度的效果这么好，是不是很想马上撸起袖子干呢？
免责声明：------图文内容来源网络,如有侵权请联系删除
